肉的宰后嫩化包扩归因于肌原玻璃弹性纤维材料设计的受损，肌原玻璃弹性纤维材料设计是由内源性核球蛋清质质酶核球蛋清质质质水解发应酶溶解肌原玻璃弹性纤维材料和人体肿瘤受损癌癌细胞骨架核球蛋清质质酶构成的。与几十块年来直到是关心主焦点的钙核球蛋清质质酶酶各个，胱天核球蛋清质质酶酶（caspases）最近几天成感意向来说题。胱天核球蛋清质质酶酶在人体肿瘤受损癌癌细胞凋亡的强制执行环节起着至关极为重要的的功效，另外caspase-3在人死之后核球蛋清质质酶核球蛋清质质质水解发应中的的功效是多多面和有难度的，以至于值得一看进两步调查。S-亚硝基化进行上变动整钙释放出、能量是什么分解、核球蛋清质质酶质溶解和人体肿瘤受损癌癌细胞凋亡来上变动整肉肥，包扩嫩度和持水工作能力。事前调查察觉到S-亚硝基化是可以变动依赖内在联系线粒体的caspase-3级联发应，这很有可能是腿部肌肉人体肿瘤受损癌癌细胞凋亡和羊肉品格影响的因为。caspase-3的调查重点村是其与人体肿瘤受损癌癌细胞凋亡的内在联系，那么，比较少有调查浅议S-亚硝基化上变动整caspase-3的机能。

2024年9月由成都水产业大学时张万刚教援拜谱生物在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生态学为该研究提供了亚硝基化绘制组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

常常版头：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

中文核心期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2025年的影响指数：5.7

发过时：2024年9月

消费者计量单位：南京农业大学

探索素材：蛋白

拜谱提拱方法：亚硝基化修饰组学

枝术路线图：

一、探讨后果

01.Caspase-3吸附性

如今尚不明白NO对caspase-3的可抑建设用有无归因于NO介导的S-亚硝基化，不一样的渗透压均值的GSNO用于外源性NO产生，以引导caspase-3的身体之外S-亚硝基化。报告单得出结论，与如果没有GSNO的组优于，100、200和400μM GSNO组的caspase-3灵渗透性同质性下降（图1），与前者消息不一。GSNO加工下降caspase-3灵渗透性的不确定性原由仍尚待系统阐述。

图1 不一样含量的GSNO进行处理对caspase-3可溶性的引响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化的程度

钻研Caspase-3的亚硝基化方面，以阐述GSNO对Caspase-3的现象性。经GSNO进行处理后，检查工具到caspase-3血清S-亚硝基化构造提高（图2）。这类报告反映，外源性GSNO教育培养可成就分析caspase-3的身体S-亚硝基化。可笑惊呆的是，在没GSNO会出现的比组中检查工具到一两个不大的S-亚硝基化带，这反映caspase-3将会发生内源性的S-亚硝基化。前者，本钻研中caspase-3的S-亚硝基化方面较高，而caspase-3的活性氧减小，这与前几天的钻研相符。但，caspase-3的特喜欢的人S-亚硝基化修饰语位点尚不知晓，还还要进两步的思考。

图2 GSNO工作对caspase-3S-亚硝基化的水平的导致

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化表达组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的回文编码序列。暗蓝色箭头的回文编码序列觉得S-亚硝基化肽，蓝色箭头的C觉得S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3降解塑料结蛋白质

结核蛋清为一些首要的细胞核膜骨架核蛋清，在确保肌细胞核膜空间结构特征的空间结构特征全部性和收宿性多方面起着首要效用，设计S-亚硝基化caspase-3对结核蛋清吸附的比较敏情绪化含有首要目的。与Std（未用胱天核蛋清酶-3和GSNO孵育的默认肌氯纶素核蛋清）组优于，0 μM GSNO组（肌原氯纶素和caspase-3的孵育，无GSNO）的全部结核蛋清含磷量差异性较低，提醒caspase-3对结核蛋清含有潜在的的核蛋清电离程度。在GSNO孵育后，全部结核蛋清的含磷量特别增强（P < 0.05）。不仅如此，当GSNO氧浓度提升时，全部结核蛋清的含磷量持续不断调涨（P < 0.05）（图5）。这种发掘取决于，SNO掩盖的caspase-3以情况依赖关系的方案仰制结核蛋清的吸附。

图5.S-亚硝基化caspase-3降解塑料结蛋白酶

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3化学降解肌钙核蛋白-T

肌钙蛋清-T (TnT)是原肌球蛋清调准承当肌收敛的细细的的必需品肌原玻纤棉蛋清。TnT的挥发表现形式是测量到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化状态下，caspase-3对TnT的挥发原因如图所显示6所显示，与Std组（不含有caspase-3和GSNO的肌原玻纤棉）比起，caspase-3组中30 kDa TnT段落相关系数加剧，说明caspase-3参与活动了TnT的挥发，因此，caspase-3与GSNO的孵育会造成30 kDa TnT减少。在100和200 μM GSNO组左右还没有测量到强烈的不同之处(P > 0.05)，而当GSNO的溶度可达到400 μM 时，该段落相关系数限制(P < 0.05)。那些察觉到说明了SNO呈现的caspase-3对TnT挥发的抑拍摄用功能。结蛋清和TnT是caspase-3的特别敏感底物，而GSNO除理减少caspase-3的灵几丁质酶是可以会造成肌原玻纤棉蛋清挥发层面减少。以上所讲，NO引诱的S-亚硝基化是可以借助呈现半胱氨酸残基来调准caspase-3的灵几丁质酶，因而进一部会影响到其对结蛋清和TnT的蛋清蛋白质水解技能，若想会影响到牛羊肉茶叶品质。

图6. S-亚硝基化caspase- 3可降解肌钙血清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人心得体会

本研究浅论旨在通过浅论S-亚硝基化对caspase-3绘制的反应还有其自后对羊肉肌原食物食物纤维休外吸附的反应。核球蛋白质S-亚硝基化不错绘制caspase-3的半胱氨酸残基，以此影响caspase-3活性酶拉低，进三步治理和改善了其对羊肉肌原食物食物纤维核球蛋白质的核球蛋白质油脂水解本事。

三、拜谱总结

钻研运用了酶活旋光度的测定，亚硝基化体现组学分折，WB等查测的手段，得知血清S-亚硝基化能能体现caspase-3的半胱氨酸残基，这产生了caspase-3催化活性的降，并举几步能够抑制了其对羊肉肌原黏胶纤维血清的血清溶解实力。本钻研为讲解血清质亚硝基化对色泽的调整体系提高没事个新的第一人称。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋清质组学、突显蛋清质组学、代谢率组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系列表產品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total氧化物重置、存在巯基，欢迎大家咨询！

参看论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663